Problem och lösningar av lång peptidsyntes

I biologisk forskning används polypeptider med en lång sekvens vanligtvis. För peptider med mer än 60 aminosyror i sekvensen används genuttryck och SDS-PAGE vanligtvis för att erhålla dem. Men den här metoden tar lång tid och den slutliga produktseparationseffekten är inte bra.

Utmaningar och lösningar för lång peptidsyntes

I syntesen av långa peptider står vi alltid inför ett problem, det vill säga det steriska hindret av kondensationsreaktionen ökar med ökningen av sekvensen i syntesen, och reaktionstiden måste justeras för att göra reaktionen fullständig. Ju längre reaktionstiden, desto fler biverkningar produceras och en del av målpeptiden bildas. Sådana rester - Bristande peptidkedjor är viktiga föroreningar som produceras i lång peptidsyntes. Därför, vid syntesen av lång peptid, är det viktigaste problemet vi måste övervinna att utforska reaktionsförhållandena och reaktionsmetoderna av hög kvalitet, för att göra aminosyrakondensationsreaktionen mer omfattande och full. Dessutom, minska reaktionstiden, eftersom ju längre reaktionstiden, desto mer okontrollerbara sidoreaktioner, desto mer komplex biprodukter. Därför sammanfattas följande tre punkter:

Mikrovågsyntes kan användas: För vissa aminosyror som uppstår i syntesprocessen som inte är enkla att integreras kan mikrovågsyntes användas. Denna metod har anmärkningsvärda resultat och minskar reaktionstiden kraftigt och minskar bildningen av två viktiga biprodukter.

Fragmentsyntesmetod kan användas: När vissa peptider är svåra att syntetiseras med vanliga syntesmetoder och inte lätt att renas, kan vi anta hela kondensationen av flera aminosyror i ett visst segment av peptiden till peptidkedjan som helhet. Denna metod kan också lösa många problem i syntesen.

Acylhydrazidsyntes kan användas: acylhydrazidsyntes av peptider är en metod för fast fas-syntes av N-terminal Cys-peptid och C-terminal polypeptidhydrazidkemisk selektiv reaktion mellan bildningen av amidbindningar för att uppnå peptidbindningsmetod. Baserat på Cys -positionen i peptidkedjan delar denna metod hela peptidkedjan i flera sekvenser och syntetiserar dem. Slutligen erhålls målpeptiden genom vätskefas kondensationsreaktion. Denna metod reducerar inte bara syntestiden för lång peptid, utan ökar också avsevärt renheten hos slutprodukten.

Lång peptidrening

Specialiteten hos långa peptider leder oundvikligen till komplexa komponenter i råa peptider. Därför är det också en utmaning att rena långa peptider med HPLC. Amyloid -serie av polypeptidreningsprocess, absorberar mycket erfarenhet och används framgångsrikt vid rening av lång peptid. Genom att använda ny utrustning, blandning av flera reningssystem, upprepad separering och andra erfarenhetsmetoder, förbättrades framgångsgraden för lång peptidrening kraftigt.