Rekombinanta proteinantigener har ofta flera olika epitoper, av vilka några är sekvensepitoper och några är strukturella epitoper.Polyklonala antikroppar erhållna genom att immunisera djur med denaturerade antigener är blandningar av antikroppar specifika för individuella epitoper och kan användas i allmänhet för att detektera naturliga strukturer eller denaturerade målproteiner.En sidofördel med att använda denaturerade proteiner som immunogener är att denaturerade proteiner tenderar att vara mer immunogena och kan stimulera ett starkt immunsvar hos djur.
Expressionssystemet för Escherichia coli väljs vanligtvis för antigena ändamål eftersom det är det mest kostsamma systemet i termer av tid och pengar.För att förbättra möjligheten för målproteinexpression och bekvämligheten med rening, uttrycks ibland endast ett litet fragment av målproteinet, såsom en specifik domän.
Den tredimensionella strukturen av proteiner
Den specifika domänen av ett protein
Om syftet med antikroppsberedningen enbart är för detektion av wb är det ekonomiskt och snabbt att använda syntetisk liten peptid som antigen, men det finns risk för svag immunogenicitet eller icke-regenericitet på grund av olämpligt val av peptidsegment.Eftersom antikroppsberedningen kräver en lång period, väljs ofta två eller tre olika peptidsegment för att framställa antikroppar med användning av polypeptidantigen för att säkerställa framgångsgraden för experimentet.
Renheten hos polypeptidantigenet för immunisering måste vara större än 80 %.Även om en högre renhet teoretiskt sett kan erhålla antikroppar med bättre specificitet, producerar djur i praktiken alltid ett stort antal icke-specifika antikroppar, vilket maskerar fördelarna med antigenrenhet.
Dessutom måste framställningen av antikroppar från små peptider tvärbindas till det lämpliga bärarantigenet för att förbättra dess immunogenicitet.Två vanliga antigena bärare är KLH och BSA.
Posttid: Mar-23-2023