Peptidernas kemiska resistens beror på sammansättningen och sekvensen av aminosyror. Lyofiliserade peptider är i allmänhet mer hållbara än deras motsvarigheter i lösning. Potentiella nedbrytningsmetoder för peptider är följande:
1, hydrolys: Detta ingår vanligtvis i ASP i sekvensen (d) för problemet i peptiden, det är mycket enkelt uttorkat för att bilda en ringimid -mellanprodukt. Till exempel finns det ASP i sekvensen. -Pro (DP) I detta fall skulle den ringformade imid-mellanprodukten som produceras genom syratalys leda till klyvningen av peptidkedjan. På liknande sätt finns Asp-Gly (DG) i sekvensen och i detta fall kan den cirkulära mellanprodukten hydrolyseras till det ursprungliga ASP-läget för isoaspartinsyra (ofarlig) eller en potentiellt inaktiv analog. Slutligen kan alla aspartinsyramönster helt omvandlas till isoaspartinsyraanaloger. "På en mindre nivå innehåller den Ser (er), en sekvens som också bildar en cirkulär imid -mellanprodukt som slutligen rengör peptidkedjan."
2, Deamidation: Denna baskatalyserade reaktion förekommer ofta i närvaro av ASN-Gly (NG) eller Gln-Gly (QG) i sekvensen och följer en liknande ASP-GLY (DG) sekvensmekanism. Deamination (aminförlust) i ASN-Gly-sekvensen ger en cyklisk imid-mellanprodukt, som sedan hydrolyseras för att ge ASN Aspartic Acid eller Isoaspartic Acid Analogs. Dessutom kan ringimid-mellanprodukten orsaka D-AP-eller extern derotation till ASND-ISO-något som liknar ASP, som alla kan vara inaktiva.
3, Oxidation: Cys och Met -rester är de viktigaste resterna som genomgår reversibel oxidation. Oxidationen av cystein påskyndas vid högre pH -värden, där tiolen lättare tar bort protonering och är benägen att generera disulfidbindningar i eller mellan kedjor. Disulfidbindningen kan enkelt vändas genom behandling med ditiotreitol (DTT) eller Tris (2-karboxyletylfosfin) hydroklorid (TCEP). Metionin oxideras av kemisk och fotokemi för att producera metionindioxid, som vidare kommer in i metionindioxid, som båda är svåra att vända.
4, Diketopiperazine and pyroglutamic acid production: formation of dimethylpiperazine usually occurs when Gly is in the third position of the N terminus, especially if Pro or Gly is in position 1 or 2. This reaction involves nucleophilic attack of the N-terminal nitrogen on the amide benzyl group between the second and third amino acids, resulting in cleavage of the first two amino acids of the Diketopiperazinmetod. Å andra sidan, om GLN är beläget vid N-terminalen, är pyroglutaminsyrasbildning nästan oundviklig. Detta är en liknande reaktion där den N-terminala kväve attackerar sidokedjens bas kol i GLN för att bilda deaminering av en pyroglutamylpeptidanalog. Denna omvandling inträffar också med N-terminalen innehållande pyroglutamatpeptidanaloger.
5. Racemization: Denna term används allmänt för att hänvisa till den totala förlusten av kiral integritet hos en aminosyra eller peptid. Racemisering involverar omvandling av en aminosyra från en baskatalyserad enantiomer, vanligtvis L-form, till typ 1 av L- och D-formen enantiomerer. : 1. Blandning. Detta är viktigare under peptidgenerering, men mindre problematisk i den färdiga peptiden. Dessutom är omkopplaren svår att upptäcka och kan inte styras.
Ett allmänt tillvägagångssätt för att undvika eller minimera nedbrytning av peptid är att försämra peptiden till-20 ° C eller bättre-80 ° C för frystorkad lagring, om tillgänglig. Om peptiden är i vattenlösning, bör varje alikvotprov frysas för att undvika frysning och tina. Exponering för PH & GT bör undvikas; Medium 8. Men om ph & gt krävs; Om peptiden smälter vid 8 bör dess exponering vara minimal.
Inläggstid: 2025-07-01